第一章
家蠶與家蠶轉(zhuǎn)基因
第一節(jié) 家蠶
第二節(jié) 家蠶轉(zhuǎn)基因
一、 家蠶轉(zhuǎn)基因的特點 /
二、 家蠶轉(zhuǎn)基因的早期研究 /
三、 家蠶轉(zhuǎn)基因研究現(xiàn)狀與發(fā)展 /
參考文獻
第二章
家蠶轉(zhuǎn)基因的載體構(gòu)建
第一節(jié) 目的基因的獲得
一、 從基因組DNA文庫獲取目的基因 /
二、 從cDNA文庫獲取目的基因 /
三、 通過PCR技術(shù)分離目的基因 /
四、 利用電子克隆獲取目的基因 /
五、 人工合成目的基因 /
第二節(jié) 啟動子的選擇
一、 組成型啟動子 /
二、 誘導(dǎo)型啟動子 /
三、 組織特異性啟動子 /
四、 家蠶RNA聚合酶Ⅲ啟動子 /
第三節(jié) 標(biāo)記基因
一、 熒光蛋白基因 /
二、 熒光素酶基因 /
三、 抗性篩選基因 /
四、 其他可視化標(biāo)記基因 /
第四節(jié) 調(diào)控元件
一、 內(nèi)含子 /
二、 增強子 /
三、 非翻譯區(qū) /
四、 絕緣子 /
五、 其他調(diào)控元件 /
第五節(jié) 家蠶轉(zhuǎn)基因常用載體
一、 轉(zhuǎn)座載體 /
二、 基因打靶載體 /
三、 人工核酸酶表達載體 /
四、 其他類型載體 /
第六節(jié) 轉(zhuǎn)基因載體構(gòu)建流程
一、 pSL-FibH-EGFP-LBS中間載體的構(gòu)建 /
二、 piggyBac重組轉(zhuǎn)座載體的構(gòu)建 /
參考文獻
第三章
家蠶外源基因?qū)爰夹g(shù)
第一節(jié) 胚胎顯微注射技術(shù)
一、 家蠶胚胎顯微注射儀器的誕生與發(fā)展 /
二、 家蠶胚胎顯微注射操作流程 /
第二節(jié) 精子介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)移技術(shù)
一、 家蠶精子介導(dǎo)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的建立 /
二、 家蠶精子介導(dǎo)轉(zhuǎn)基因操作流程 /
第三節(jié) 其他外源基因?qū)爰夹g(shù)
一、 電穿孔法 /
二、 壓力滲透法 /
三、 基因槍法 /
四、 病毒介導(dǎo)法 /
五、 脈沖場電泳法 /
參考文獻
第四章
轉(zhuǎn)基因家蠶的篩選與鑒定
第一節(jié) 轉(zhuǎn)基因家蠶的篩選
一、 熒光標(biāo)記 /
二、 顯性顏色變化標(biāo)記 /
三、 其他表型變化識別標(biāo)記 /
第二節(jié) 外源基因的整合與表達分析
一、 外源基因的整合分析 /
二、 外源基因的表達分析 /
第三節(jié) 外源基因表達產(chǎn)物的生物活性及功能檢測
一、 表達產(chǎn)物的生物活性分析 /
二、 表達產(chǎn)物的功能測試 /
第四節(jié) 內(nèi)源基因定點突變家蠶的鑒定
一、 T7E1酶切鑒定內(nèi)源基因定點突變家蠶 /
二、 其他鑒定突變個體的核酸內(nèi)切酶 /
三、 限制性內(nèi)切酶酶切檢測法 /
參考文獻